基于基线等比增减设计法优选牛膝白芍对帕金森病肝阳上亢证小鼠神经保护作用的最佳配比研究

目的 探讨牛膝白芍配伍对帕金森病肝阳上亢证小鼠发挥神经保护作用的最佳比例。方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、牛膝白芍不同配比(牛膝与白芍配伍比例分别为0∶4、1∶4、1∶2、1∶1、2∶1、4∶1、4∶0)组。采用附子汤[3g/(kg·d)]灌胃联合腹腔注射MPTP[30mg/(kg·d)]法制备帕金森病肝阳上亢病证结合小鼠模型,各配比组造模后灌胃给药14天[6.5g/(kg·d)],模型组与对照组给予相应体积蒸馏水。通过激惹实验、转棒实验观察小鼠行为学改变;运用CompuSyn软件计算牛膝与白芍配伍联合指数(combination index,CI)及效应值(effect value,Fa);采用免疫组化及蛋白印迹实验(Western blot)法测定黑质酪氨酸羟化酶(trosine hydroxylase,TH)的阳性表达水平及蛋白相对表达量。结果 除0∶4、4∶1、4∶0组外,牛膝白芍各配比组均能明显降低小鼠的易激惹程度(P<0.05);各配比组均能明显延长小鼠的掉落潜伏期(P<0.05)。CompuSyn软件计算结果表明,牛膝与白芍各配比组的CI值均<1,两药联用具有协同增效作用,以1∶2比例联用时为最佳配伍比例(CI=0.860,Fa=0.235)。免疫组化及Western blot法实验结果表明,各配比组均可不同程度提高小鼠中脑黑质TH阳性表达及蛋白表达量(P<0.05),且均以1∶2组作用显著。结论 牛膝白芍联用抗帕金森病肝阳上亢证的最佳配伍比例为1∶2。